【题目】某实验小组对微生物的培养和五种香辛料萃取提取的精油(编号为A、B、C、D、E)抑菌能力进行了研究。首先制备了直径为8mm的圆滤纸片若干,灭菌后分别放入各组精油中浸泡2h。然后取各种待测菌悬液各0.1mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布,制成含菌平板。再取浸泡过精油的滤纸片贴在含菌平板上,每个培养皿贴浸过同一种精油的滤纸3片。放培养箱中培养一定时间,测定抑菌圈直径,结果取三次重复实验的平均值,其数据如下表所示:
精油种类 抑菌圈直径(mm) 菌种 | A | B | C | D | E |
大肠杆菌 | 21.1 | 26.0 | 15.1 | 24.0 | 23.2 |
白葡萄球菌 | 14.7 | 22.0 | 19.1 | 12.0 | 29.1 |
酵母菌 | 24.6 | 33.0 | 26.0 | 24.5 | 49.6 |
青霉 | 25.3 | 38.2 | 24.3 | 25.1 | 42.8 |
(1)培养不同的微生物所需的pH和温度往往不同,在培养霉菌时需要将培养基的pH值调至______________(填“酸性”、“碱性”、“中性或微碱性”)。培养细菌的温度一般______________(填“低于”或“高于”)培养霉菌的温度。
(2)萃取精油时蒸馏过程中需要控制蒸馏的温度和时间,原因是______________。
(3)本实验中采用了______________操作接种。结果可见不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同,C和E对细菌的杀伤作用______________(填“大于”或“小于”)对真菌的杀伤作用。
(4)若用固定化酶技术固定酵母菌中的酶,和一般酶制剂相比,其优点是______________。固定化酵母细胞常用______________法固定化。
(5)有同学认为缺少关于五种精油是否抗病毒的实验结果,提出在营养琼脂培养基上接种常见的病毒进行实验。你认为可以吗?为什么?________________________________________________________。
【答案】酸性 高于 如果蒸馏温度太高,时间太短,产品品质就比较差 稀释涂布平板 小于 利于产物的纯化,同时固定在载体上的酶还可以被反复利用 包埋 不可以,病毒为寄生生物,在该培养基上不能生长
【解析】
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。细菌一般在30~37℃的温度下培养l~2d,放线菌一般在25~28℃的温度下培养5~7d,霉菌一般在25~28℃的温度下培养3~4d。
(1)根据上述分析可知,在培养霉菌时需要将培养基的PH值调至酸性。培养细菌的温度一般高于培养霉菌的温度。
(2)如果蒸馏温度太高,时间太短,产品品质就比较差,所以萃取精油时蒸馏过程中需要控制蒸馏的温度和时间。
(3)本实验中是将各种待测菌悬液各0.1mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布,即采用了稀释涂布平板法接种。表格中不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同,大肠杆菌和白葡萄球菌为细菌,酵母菌和青霉为真菌,C和E对细菌产生的抑菌圈小于真菌的抑菌圈,说明C和E对细菌的杀伤作用小于对真菌的杀伤作用。
(4)固定化酶技术固定酵母菌中的酶,和一般酶制剂相比,其优点是可重复利用,且利于产物的纯化。由于细胞个体大,不易被吸附和结合,所以固定化酵母细胞常用包埋法固定化。
(5)由于病毒为寄生生物,不能独立代谢,在该培养基上不能生长,所以不能在琼脂培养基上接种常见的病毒进行实验。
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